保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融
溶解性:溶于部分有机溶剂(如DMSO、DMF),不溶于水
CAS:326802-08-8
英文名称:4'-AMinoMethyl-5-FAM
中文名称:4'-氨甲基-5-羧基荧光素
分子式:C22H15NO7
分子量:405.36
规格:5mg、10mg、25mg
纯度:95%+
展开剩余79%二、结构特征核心骨架:基于荧光素结构,保留其经典的螺环异苯并呋喃-呫吨体系。
关键官能团:
5位羧基(-COOH) :可与氨基反应形成酰胺键,用于共价标记含氨基的生物分子。
4'位氨甲基(-CH2NH2) :提供伯氨基,可与羧基、醛基或活性酯反应,拓展偶联灵活性。
双功能设计:同时具备羧基和氨甲基,使其既能作为亲核试剂又能作为亲电试剂,适用于多类型生物偶联。
三、使用方法:荧光标记流程(一)通用标记原理
该试剂含 氨甲基(-CH2NH2) 和 羧基(-COOH) 双功能基团,可通过以下反应偶联生物分子:
氨甲基:与目标分子的羧基缩合。
羧基:与目标分子的氨基缩合。
(二)标记对象与步骤
1. 核酸标记
适用技术:qPCR探针、FISH探针、基因芯片。
步骤:
将核苷酸修饰为含羧基或氨基的衍生物。
取适量4'-AMinoMethyl-5-FAM溶于无水DMSO。
加入缩合剂EDC和NHS,室温反应30分钟激活羧基。
加入修饰核苷酸,避光搅拌2-4小时。
纯化:乙醇沉淀或凝胶过滤去除未标记染料。
2. 蛋白质/抗体标记
适用技术:免疫荧光、Western Blot、流式细胞术。
步骤:
蛋白溶液用PBS透析去除伯胺杂质。
染料溶于DMSO后,按染料:蛋白摩尔比5-10:1加入蛋白溶液。
加入EDC/NHS,避光反应2小时(4℃)。
终止反应:加入甘氨酸或透析纯化。
3. 小分子/纳米载体标记
应用:药物递送追踪、细胞成像示踪。
步骤:
直接与含羧基/氨基的载体偶联,方法同蛋白质标记。
四、关联试剂AF546 酪胺
AF594 酪胺
Maleimide
NHS Ester
Maleimide
Cadaverine
Cadaverine
NHS Ester
Picolyl Azide
C2 Maleimide
Ethyl NHS Ester
Rho 13 NHS Ester
Rho 101 NHS Ester
AF594 Picolyl Azide
594 Succinimidyl Ester
Pomalidomide-C6-NH2
Alexa Fluor 647 Concanavalin A
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